مقایسه کمی تولید پروتئین نوترکیب انتهای کربوکسیل نوروتوکسین بوتولینوم a در کشت های ناپیوسته و ناپیوسته خوراک دهی شده باکتری اشرشیا کلی
نویسندگان
چکیده
سابقه و هدف: پروتئین 50 کیلو دالتونی واقع در انتهای کربوکسیل زنجیره سنگین نوروتوکسین کلستریدیوم بوتولینوم تیپ a (bont/a-hc) امروزه برای تولید واکسن نوترکیب علیه بوتولیسم به کار می رود. هدف از این پژوهش بررسی تولید این پروتئین نوترکیب در باکتری اشرشیا کلی در کشت های با تراکم سلولی بالا (ناپیوسته خوراک دهی شده) و مقایسه تولید آن با کشت های ناپیوسته بود. مواد و روش ها: در این مطالعه، رشد باکتری اشرشیا کلی حاوی پلاسمید نوترکیب در محیط m9 اصلاح شده با فرایند کشت ناپیوسته بررسی گردید. به منظور افزایش بیان پروتئین نوترکیب، میزان غلظت القاکننده isopropyl β-d-thiogalactoside و زمان القا در fermentor با حجم کاری 2 لیتر، به کمک روش آماری taguchi بهینه گردید. سپس کشت ناپیوسته خوراک دهی شده با روش خوراک دهی نمایی با حجم ثابت تا رسیدن به تراکم سلولی بالا انجام گرفت. در پایان میزان بیان پروتئین نوترکیب هدف به کمک روش bradford و دانسیتومتری ژل sds-page محاسبه شد. یافته ها: در شرایط بهینه شده کشت ناپیوسته و ناپیوسته خوراک دهی شده، به ترتیب مقدار 62 و 486 میلی گرم پروتئین نوترکیب bont/a-hc به ازای یک لیتر از محیط کشت حاصل گردید. استنتاج: بر اساس یافته های این تحقیق می توان نتیجه گیری کرد که رسیدن به تراکم سلولی بالا در کشت های ناپیوسته خوراک دهی شده در افزایش بازدهی تولید پروتئین های نوترکیب بسیار مؤثر است.
منابع مشابه
مقایسه کمی تولید پروتئین نوترکیب انتهای کربوکسیل نوروتوکسین بوتولینوم A در کشت‌های ناپیوسته و ناپیوسته خوراک‌دهی‌شده باکتری اشرشیا کلی
Background and purpose: The 50 KDa protein (50 µg) in carboxylic domain of the neurotoxin heavy chain (BoNT/A-Hc) recognizes surface receptors on target neurons and this fragment contains the principle protective antigenic determinants. Recently, this fragment has been used as a recombinant vaccine candidate for botulism. The study aimed to compare the evaluation of BoNT/A-Hc production in fed-...
متن کاملبیان و تخلیص پروتئین نوترکیب انتهای کربوکسیل نوروتوکسین بوتولینوم A در باکتری اشریشیاکلی به عنوان کاندیدای تولید واکسن بوتولیسم
چکیده زمینه و هدف: بوتولیسم بیماری کشنده‌ای است که توسط نوروتوکسین یکی از هفت نوع کلستریدیوم بوتولینوم ایجاد می‌شود. بخش کربوکسیل زنجیره سنگین نوروتوکسین کلستریدیوم بوتولینوم تیپ A(BoNT/A-Hc)، از قابلیت بالایی در تحریک سیستم ایمنی برخوردار است که امروزه برای تولید واکسن نوترکیب علیه بوتولیسم به کار می‌رود. هدف از این پژوهش بیان و تخلیص فرم محلول این بخش از نوروتوکسین در باکتری اشریشیاکلی نوترک...
متن کاملبیان و تخلیص پروتئین نوترکیب انتهای کربوکسیل نوروتوکسین بوتولینوم a در باکتری اشریشیاکلی به عنوان کاندیدای تولید واکسن بوتولیسم
چکیده زمینه و هدف: بوتولیسم بیماری کشنده ای است که توسط نوروتوکسین یکی از هفت نوع کلستریدیوم بوتولینوم ایجاد می شود. بخش کربوکسیل زنجیره سنگین نوروتوکسین کلستریدیوم بوتولینوم تیپ a(bont/a-hc)، از قابلیت بالایی در تحریک سیستم ایمنی برخوردار است که امروزه برای تولید واکسن نوترکیب علیه بوتولیسم به کار می رود. هدف از این پژوهش بیان و تخلیص فرم محلول این بخش از نوروتوکسین در باکتری اشریشیاکلی نوترکی...
متن کاملهمسانسازی و بیان نوترکیب دُمین انتهای کربوکسیل پروتئین اینتیمین پاتوژن EHEC در باکتری اشرشیا کلی سویه BL21(DE3)
چکیده زمینه و هدف: بخشی از عفونت‌های روده‌ای به‌واسطه پاتوژن‌هایی به‌وجود می‌آ‌یند که با مصرف مواد غذایی آلوده وارد سیستم گوارش انسان می‌شوند. در لانه‌گزینی باکتری E. coli O157:H7 در روده بزرگ مجموعه‌ای از پروتئین‌ها که برخی از آنها شروع‌کننده این فرآیند بوده و فقدان آنها مانع از این پدیده می‌شود، دخیل هستند. هدف از انجام این پژوهش همسان‌سازی و بیان نوترکیب پلی‌پپتید ا...
متن کاملتأثیر راهبرد خوراک دهی بر تولید پروتئین نوترکیب در کشت ناپیوسته با خوراک دهی مخمر متیلوتروف پیکیا پاستوریس
مخمر متیلوتروف پیکیا پاستوریس یکی از بهترین میزبان ها برای تولید پروتئین نوترکیب به علت حضور پروموتر قوی الکل اکسیداز ? که با متانول القاء می شود، می باشد. در این پژوهش سویه نوترکیب پیکیا پاستوریس (gs115/his+ mut+) که به صورت درون سلولی آنزیم بتا-گالاکتوزیداز را تولید می کند، برای بررسی راهبردهای متداول خوراک دهی به منظور افزایش تولید پروتئین نوترکیب در طول کشت های ناپیوسته با خوراک دهی متانول ...
15 صفحه اولهمسان سازی و بیان نوترکیب دُمین انتهای کربوکسیل پروتئین اینتیمین پاتوژن ehec در باکتری اشرشیا کلی سویه bl۲۱(de۳)
چکیده زمینه و هدف: بخشی از عفونت های روده ای به واسطه پاتوژن هایی به وجود می آ یند که با مصرف مواد غذایی آلوده وارد سیستم گوارش انسان می شوند. در لانه گزینی باکتری e. coli o157:h7 در روده بزرگ مجموعه ای از پروتئین ها که برخی از آنها شروع کننده این فرآیند بوده و فقدان آنها مانع از این پدیده می شود، دخیل هستند. هدف از انجام این پژوهش همسان سازی و بیان نوترکیب پلی پپتید انت...
متن کاملمنابع من
با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید
عنوان ژورنال:
مجله دانشگاه علوم پزشکی مازندرانجلد ۲۳، شماره ۱۰۴، صفحات ۲-۱۰
میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com
copyright © 2015-2023